【多聚甲醛固定】在生物组织学和细胞生物学研究中，固定是制备样本的关键步骤之一。其主要目的是通过化学试剂使细胞结构稳定，防止自溶或腐败，以便后续的切片、染色及显微观察。其中，“多聚甲醛固定”是一种广泛应用的固定方法，因其对细胞结构的保存效果较好而受到青睐。
一、多聚甲醛固定概述
多聚甲醛（Polyformaldehyde）是一种高分子聚合物形式的甲醛，通常以粉末状或颗粒状出售，在使用前需溶解于水或缓冲液中。它在固定过程中能够与蛋白质中的氨基发生交联反应，从而稳定细胞结构，减少细胞成分的流失。
与单体甲醛相比，多聚甲醛具有较低的挥发性和毒性，因此在实验室中更安全、更易操作。同时，它的固定效果较为温和，适合用于多种类型的组织和细胞样本。
二、多聚甲醛固定的特点
| 特点 | 描述 |
| 固定效果 | 能有效保存细胞形态和亚细胞结构，尤其是细胞膜和细胞器 |
| 毒性低 | 相较于单体甲醛，挥发性较低，对人体危害较小 |
| 稳定性好 | 多聚甲醛溶液在常温下可长期保存，不易分解 |
| 操作简便 | 配制简单，无需特殊通风设备 |
| 适用范围广 | 可用于动物组织、植物组织、细胞培养等 |
三、多聚甲醛固定的操作流程
1. 准备固定液：将适量多聚甲醛粉末加入缓冲液（如PBS或0.1M磷酸盐缓冲液）中，加热搅拌至完全溶解。
2. 固定时间：根据样本类型和厚度，通常固定时间为12-24小时，部分样本可缩短至数小时。
3. 清洗：固定后用缓冲液冲洗数次，去除残留的固定剂。
4. 后续处理：根据实验目的进行脱水、包埋、切片、染色等操作。
四、注意事项
- 多聚甲醛溶液应现配现用，避免长时间存放。
- 操作时应佩戴手套和口罩，防止吸入蒸气。
- 不同组织类型可能需要调整固定时间和浓度。
- 固定后的样本应尽快进行后续处理，避免长时间浸泡导致结构破坏。
五、总结
多聚甲醛固定是一种高效、安全且应用广泛的固定方法，适用于多种生物样本的制备。其优点在于对细胞结构的保护较好，同时操作相对简便，适合实验室常规使用。合理掌握其使用方法和注意事项，有助于提高实验结果的准确性和可重复性。
